Caracterización química de metabolitos aislados en un extracto con actividad antimicrobiana y antifúngica de la ascidia, Rhopalaea sp. Proveniente del área de Cuajiniquil, Guanacaste, Costa Rica

Abstract

Marine ecosystems have a very large amount of resources, most of them are still partially unknown, and few have been exploited for development of new industrial and toxicological products. The objective of this investigation was to determine if ascidia Rhopalaea sp. from the Pacific coast of Costa Rica had these chemical defenses against the bacteria Staphylococcus aureus and fungi Geotrichum candidum, and if so, to determine their main secondary metabolites in the extract. Ascidian was collected from the zone of Cuajiniquil, Guanacaste, between December 2007 and March 2008. Activity evaluation against the Gram positive bacteria and fungi was performed on ethanolic (95%) and acetonic extracts. Both extracts showed activity against Geotrichum candidum but only the acetonic extract showed activity against Staphylococcus aureus. A coumarin and one hydroxyanthraquinone were isolated from a crude extract of Rhopalaea sp. as metabolites present in the active fraction. The purification and isolation were performed by chromatographic techniques and solid phase extraction. Structural information was obtained by spectroscopy analyses: Ultraviolet (UV-Visible), Fourier Transform Infrared (FT-IR), Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry (LC/MS/MS), Gas Chromatography Mass Spectrometry (GC/MS), Nuclear Magnetic Resonance of Proton (1 HNMR), and Carbon-13 (13C-NMR). Further studies are necessary for a characterization of their active components of this extract and a possible elucidation of the mechanisms of action.

Los ecosistemas marinos poseen una gran cantidad de recursos escasamente explotados que tienen grandes perspectivas para el desarrollo de nuevos productos industriales y toxicológicos. El objetivo de esta investigación fue determinar si la ascidia Rhopalaea sp. de la costa Pacífica de Costa Rica presenta estas defensas químicas contra la bacteria Staphylococcus aureus y el hongo Geotrichum candidum, y si es así, determinar metabolitos secundarios presentes en el extracto. Se colectó la ascidia en la zona de Cuajiniquil en la provincia de Guanacaste entre los meses de diciembre del 2007 y marzo del 2008. Se realizaron extractos crudos en acetona y etanol al 95% para evaluar la actividad contra una bacteria Gram positiva y un hongo. Ambos extractos presentaron actividad contra Geotrichum candidum y el extracto acetónico mostró actividad contra Staphylococcus aureus. Se logró aislar y caracterizar globalmente una cumarina y una hidroxiantraquinona como metabolitos presentes en la fracción responsable de la actividad biológica presentada. La purificación fue llevada a cabo con técnicas cromatográficas y extracción en fase sólida. La información estructural fue obtenida por análisis espectroscópicos; Ultravioleta (UV-Visible), Infrarrojo con Transformada de Fourier (FT-IR), Cromatografía Liquida acoplada a Espectrometría de Masas (LC/MS/MS), Cromatografía de Gases acoplada a Masas (GC-MS), Resonancia Magnética Nuclear de Protón (1 H-NMR) y Resonancia Magnética de Carbono 13 (13C-NMR). Se recomienda estudios futuros para la caracterización de los principios activos de este extracto y una posible elucidación de sus mecanismos de acción.