Infectious capability of the plus (+) and minus (-) strands of parvovirus LUIII
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Abstract
The replication of autonomous parvovirus LuIII and its encapsidation
pattern have not been fully explained. Two genomic clones of LuIII, pBLu(+) and
pBLu(-), were constructed. These clones were used to produce the (+) or (-) ss
viral DNA, to assess the capability of infection of the individual strands. Three
different techniques were utilized to obtain the single-stranded LuIII DNA. Only
the treatment with Exonuclease III yielded both strands from the pBLu(+)
construct. Each polarity of the single-stranded LuIII DNA was independently
transfected into cancerous HeLa cells by electroporation. The results obtained
suggest that both the ss(+) and ss(-) LuIII DNA were capable of establishing an
infection in these cells. The (-) strand produced 100% cell lysis two days prior to
the (+) strand, appearing to be more effective in the establishment of viral
infection. La replicación y el patrón de encapsidación del parvovirus LuIII no han
sido explicados completamente. Dos clones genómicos de LuIII, pBLu(+) y
pBLu(-), fueron construidos. Estos clones fueron utilizados para tratar de
producir ADN viral de hebra sencilla de polaridad (+) o (-). Se intentaron tres
técnicas diferentes para obtener el ADN viral de hebra sencilla de LuIII.
Solamente el tratamiento con Exonucleasa III produjo ambas hebras utilizando la
construcción pBLu(+). Ambas polaridades del ADN de hebra sencilla de LuIII
fueron transfectadas a células cancerosas HeLa por electroporación. Los
resultados obtenidos sugieren que las hebras de ADN de polaridad (+) y (-) de
LuIII fueron capaces de establecer una infección en estas células. La hebra (-)
alcanzó 100% de lisis celular dos días antes que la hebra (+), aparentando ser
más efectiva en el establecimiento de la infección viral.
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